Клинико-диагностическое значение исследования концентрации мочевины в сыворотке крови и моче. Практическое занятие. «Конечные продукты обмена простых белков. Методы определения мочевины и креатинина». Учебные вопросы для самоподготовки студентов 1. Использование аминокислот в тканях. 2. Пути распада аминокислот (в виде формул): 2.1. Трансаминирование, роль АСТ и АЛТ. 2.2. Непрямое дезаминирование, роль глутаматдегидрогеназы. 2.3. α-Декарбоксилирование, образование биогенных аминов (гистамина, ГАМК и др.), обезвреживание биогенных аминов. 3. Роль витамина В6 в обмене аминокислот. 4. Реакции образования аммиака в организме. Токсичность аммиака. 5. Способы обезвреживание аммиака в организме. Орнитиновый цикл. Энзимопатии цикла синтеза мочевины. Диагностическое значение определения мочевины. 6. Обмен креатина. Синтез креатина, образование креатинфосфата и креатинина. Биологическая роль креатинфосфата. Диагностическое значение определения креатина, креатинина и креатинкиназы. 7. Наследственные болезни обмена аминокислот (ФКУ, алкаптонурия, альбинизм, болезнь Хартнупа и др.). Тема реферативного сообщения «Энзимопатии обмена аминокислот. Генетический скрининг новорожденных» Лабораторные работы, выполняемые на занятии: 1) определение концентрации мочевины в сыворотке крови и моче; 2) определение концентрации креатинина в сыворотке крови и моче. 3) расчет клиренса креатинина. На занятии студенты пишут обучающий тест и решают проблемные задачи. Литература: Кухта В.К. и соав. Основы биохимии. М., Медицина, 2007, с.246-262, 394-397. Пустовалова Л.М. Основы биохимии для мед. Колледжей. Ростов н/Д: Феникс, 2004. С.234-249. Пустовалова Л.М. Практические работы по биохимии. Ростов н/Д. 2004. с.181-188. Лекции по курсу биохимии. Методическое пособие для самостоятельной работы студентов. МОЧЕВИНА. Мочевина – конечный азотсодержащий продукт обмена веществ. Синтез моче-вины в печени – основной путь обезвреживания аммиака в организме. В норме кон-центрация мочевины в сыворотке/плазме крови – 2,61-8,35 ммоль/л (уреазный метод), 15-38,5 мг%. Азот мочевины – 7-18 мг% или 2,5-6,4 ммоль/л. Коэффициент перевода для азота мочевины: мг% в ммоль/л 0,357, обратно – 2,8. Мочевина выводится из организма с мочой. Азот мочевины составляет 85-90% от общего азота мочи. В норме у взрослых выводится мочевины 20-35 г/сут (330-580 ммоль/сут), или азота мочевины – 710-1049 ммоль/сут. Методы определения мочевины. · Колориметрический химический. Принцип метода:мочевина образует с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбозида и ионов Fe3+ в сильнокислой среде комплекс красного цвета; интенсивность окрашивания оценивают фотометрически при длине волны 525 нм. · Колориметрический ферментативный уреазный метод. Принцип метода: Мочевина + Н2О уреазаNH3 + CO2 NH3 + салицилат натрия + гипохлорит натрия нитропруссид натрия продукт зеленого цвета Интенсивность окраски продукта реакции пропорциональна концентрации мочевины. · Спектрофотометрический (УФ), ферментативный уреазный метод. Принцип метода: Мочевина + Н2О уреазаNH3 + CO2 NH3 + α-кетоглутарат + НАДН2 глутаматдегидрогеназа глутамат + НАД++ Н2О (непрямой тест Варбурга). Скорость окисления НАДН попорциональна концентрации мочевины. Клинико-диагностическое значение исследования концентрации мочевины в сыворотке крови и моче. Определение концентрации мочевины в сыворотке крови используется для оценки функции печени и выделительной функции почек. Критическая концентрация мочевины в крови: ˃28,0 ммоль/л. Причины увеличения концентрации мочевины в сыворотке крови:острые или хронические заболевания почек; обтурация мочевыводящих путей; снижение тока крови через почечные клубочки (застойная сердечная недостаточность, обширные ожоги, тяжелая диарея и рвота, инфаркт миокарда и др.); повышенный катаболизм белков (длительное голодание, кровотечения в ЖКТ, инфекции, канцерогенез, сахарный диабет и др.); снижение концентрации Cl-. Причины снижения концентрации мочевины в сыворотке крови:функциональная недостаточность печени (гепатит, цирроз, отравления мышьяком и др.); энзимопатии синтеза мочевины; повышенная скорость клубочковой фильтрации, обусловленная беременностью, чрезмерным объемом внутривенных инфузий, неадекватной секрецией антидиуретического гормона; мальабсорбция (целиакия). Влияющие факторы. Увеличение концентрации: диета с высоким содержанием белка, прием нефротоксичных лекарств, повышенный распад тканей при гипертиреозе, приеме глюкокортикоидов. Уменьшение концентрации:вегетарианская диета. Определение концентрации мочевины в моче позволяет контролировать азотистый баланс у больных в тяжелом состоянии, получающих зондовое энтеральное и парентеральное питание. Корректно оценить азотистый баланс с использованием этого теста можно лишь при отсутствии тяжелой печеночной или почечной патологии. Увеличением концентрации мочевины в моче, указывающим на отрицательный азотистый баланс, сопровождаются: послеоперационный период, лихорадка; гипертиреоз; тяжелые острые или хронические соматические заболевания. Уменьшением, указывающим на положительный азотистый баланс, сопровождаются: беременность; период роста у детей; период восстановления после тяжелых заболеваний. Азотистый баланс может быть рассчитан по формуле: АБ (г) = [поступивший белок : 6,25] – [общий азот мочи + 4] где 6,25 – коэффициент пересчета количества белка в количество азота: 6,25 г белка = 1 г азота; 4 г – поправка на дополнительные потери азота организмом. КРЕАТИНИН. Креатинин– это конечный продукт неферментативного превращения креатина и креатинфосфата, участвующих в энергообеспечении мышечного сокращения. Креатинин выводится из организма через почки с мочой, относится к беспороговым веществам, которые поступают в мочу путем фильтрации и не реабсорбируются в канальцах. Нормы креатинина в сыворотке крови у взрослых: мужчины – 40-100 мкмоль/л (или 8-13 мг/л), женщины – 44-88 мкмоль/л (6-10 мг/л) (колориметри-ческий химический метод с пикриновой кислотой, метод Поппера); креатинина в моче у взрослых -4,4-17,7 ммоль/сут (тот же метод). |