 ПОЗНАВАТЕЛЬНОЕ Сила воли ведет к действию, а позитивные действия формируют позитивное отношение Как определить диапазон голоса - ваш вокал Игровые автоматы с быстрым выводом Как самому избавиться от обидчивости Противоречивые взгляды на качества, присущие мужчинам Вкуснейший "Салат из свеклы с чесноком" Натюрморт и его изобразительные возможности Применение, как принимать мумие? Мумие для волос, лица, при переломах, при кровотечении и т.д. Как научиться брать на себя ответственность Зачем нужны границы в отношениях с детьми? Световозвращающие элементы на детской одежде Как победить свой возраст? Восемь уникальных способов, которые помогут достичь долголетия Классификация ожирения по ИМТ (ВОЗ) Глава 3. Завет мужчины с женщиной
Оси и плоскости тела человека - Тело человека состоит из определенных топографических частей и участков, в которых расположены органы, мышцы, сосуды, нервы и т.д.
| Определение фаготипов брюшнотифозных палочек
Фаготипирование - это определение принадлежности выделенного бактериального штамма к тому или иному фаготипу. Фаготип - это совокупность бактериальных штаммов, характеризующихся одинаковой чувствительностью к типовому набору бактериофагов. Бактериофаг - это вирус, способный инфицировать бактериальную клетку, репродуцироваться в ней и вызывать ее лизис. Фаготипирование применяется, как правило, в интересах эпидемиологического анализа - это сопоставление эпидемиологических, клинических, лабораторных и других данных применительно к определенной инфекционной болезни с целью установления причин ее распространения, определения характера и масштабов необходимых противоэпидемических мер.
Фаготипирование проводится по следующей методике. На чашки Петри засевают шпателем взвеси исследуемых культур. На засеянную поверхность агара пипетками наносят аккуратными каплями индикаторные бактериофаги различных типов. Места нанесения фагов маркируют на дне чашки. Пипетки и шпатель помещают в стакан с дезинфицирующим раствором. Посевы помещают в термостат на 24 часа. Через сутки учитывают результат. На поверхности выросших исследуемых культур определяют зоны лизиса бактерий соответствующим типом фага. Сравнивают фаготипы культур, выделенных из разных источников. В данном случаев даны две культуры: выделенная от больного и из водного источника. На чашках видно, что лизис культур происходит при действии одного и того же вида фага Д5. Фаготип обеих выделенных культур - Д5, значит, выделенные культуры микроорганизмов идентичны по фаготипу больной мог заразиться при употреблении инфицированной воды.
Цветная проба Один из методов обнаружения вируса в исследуемом материале, идентификация вируса и обнаружения антител в сыворотке крови обследуемого пациента. Общим принципиальным положением при выделении вирусов является их культивирование в живой клетке (культура ткани, куриный эмбрион, организм животного). В основе идентификации вирусов лежит принцип нейтрализации, т.е. взаимодействие вируса со специфической иммунной сывороткой, в результате которого вирус утрачивает способность проявлять свою активность в действии на субстрат (клетки культуры ткани, эритроциты, куриный эмбрион и т.п.). Культура клеток – клетки какой-либо ткани животных или человека, способные расти и размножаться в искусственных условиях. Культуры клеток широко применяются при диагностике вирусных инфекций, в производстве вакцин, незаменимы при проведении научных исследований в области вирусологии. Для успешного получения клеточных культур и последующего размножения в них вирусов культивируемые клетки должны постоянно находиться в сбалансированной физиологической среде, содержащей все необходимые компоненты для их жизнедеятельности и размножения. Питательные потребности клеток обеспечиваются наличием незаменимых аминокислот (таких, как глутамат, лейцин, изолейцин, валин, фенилаланин, аргинин, гистидин, метионин, треонин, цистин, тирозин), витаминов (особенно комплекса В), глюкозы и сыворотки крови. Изотоничность и буферность среды поддерживается с помощью неорганических солей. Оптимальным является рН 7,2-7,4, при длительном культивировании клеток значение рН должно оставаться в пределах 6,8-7,8. Постоянство рН в течение нескольких дней обеспечивается присутствием карбонатного и фосфатного буферов. Стабилизации значения рН способствует выращивание культур в пробирках и флаконах, закрытых резиновыми пробками, вследствие чего не улетучивается СО2 (в противном случае это привело бы к сдвигу рН в щелочную сторону). Контроль за реакцией среды осуществляется путём добавления индикатора фенолрот: при рН 6,8-7,2 среда имеет жёлтый цвет, при рН 7,2-7,4 – оранжево-розовый, при рН 7,4-7,6 – красный, при рН 7,7-7,8 – красно-фиолетовый. Индикацию вирусов в культуре клеток проводят на основании феномена цитопатического действия (ЦПД). Если вирусы не размножаются в культуре клеток, то живые клетки в процессе своего метаболизма выделяют кислые продукты, что ведет к изменению рН среды и цвета индикатора фенолового красного на желтый. При продукции вирусов нормальный метаболизм клеток нарушается, клетки гибнут, и среда сохраняет свой первоначальный (красный) цвет. Таким образом, красный цвет среды указывает на наличие вируса и прекращение жизнедеятельности клеток. Для идентификации вирусов используется феномен задержки цитопатического действия (ЗЦПД). При этом можно определить соответствие вируса и вируснейтрализующей сыворотки, если их предварительно смешать и эту смесь после инкубации внести в культуру клеток. Специфическая сыворотка нейтрализует вирус, он не оказывает цитопатическое действие на клетки культуры, клетки остаются живы, изменяется рН и цвет среды становиться желтым.
Тот же феномен (ЗЦПД) лежит в основе серологических реакций. В пробирку вноситься среда 199, культура клеток и смесь вирусного диагностикума (известный АГ) и сыворотки крови обследуемого (неизвестные АТ). При соответствии АТ вирусному АГ происходит реакция нейтрализации, культура клеток остается жизнеспособной и изменяется цвет среды на желтый.
|
