Лабораторная диагностика вирусных заболеваний. Вирусы. РНК – содержащие вирусы гриппа, бешенства и полиомиелита. План 1. Общая характеристика вирусов. 2. Вирусы гриппа. 3. Вирусы бешенства. 4. Вирусы полиомиелита. 1. Вирусы открыты Ивановским в 1892г. Русский учёный-ботаник открыл вирус табачной мозаики. Но увидеть вирусы смогли намного позже, после создания электронного микроскопа. Вирусы составляют царство живой природы Vira. Характеризуются следующими свойствами: - содержат 1 тип нуклеиновой кислоты ДНК или РНК; - не имеют своих белоксинтезирующих и нуклеосинтезирующих систем; - не имеют клеточной организации; - паразитизм осуществляется на генетическом уровне, т.е. вирусный генетический аппарат может полностью или частично встраиваться в геном клетки и в дальнейшем воспроизводится как её часть; - не растут на искусственных питательных средах; - размеры в 1000 раз меньше бактериальных; -2 формы существования: внеклеточная – покоящаяся и внутриклеточная - вегетативная. Морфология | | Капсид (белковая оболочка) состоит из капсомеров | | Суперкапсид (из остатков клеток) | | ДНК или РНК может быть однониточные или двуниточные, линейные и кольцевые, фрагментарные, + нить и минус-нить. Вирусы имеют формы: - круглые или сферические - палочковидные - нитевидные - многогранники Фаги имеют головку и отросток. Базальная пластинка с шипиками для закрепления на клетке | | Шейка (полый стержень, сокращается) | | Репродукция вирусов: 1 стадия – адсорбция вириона на клетке с помощью рецепторов 2 стадия – проникновение внутрь клетки 3 стадия – освобождение ДНК (РНК) от капсида, 4 стадия – репликация вирусной ДНК (РНК) и синтез вирусных белков, системами клетки. 5 стадия – сборка вирусных частиц – вирионов, 6 стадия – выход вирионов из клетки хозяина, последняя чаще всего погибает. Противовирусный иммунитет: на внеклеточную форму вирусов действуют: неспецифические и специфические факторы резистентности  -клеточная ареактивность, формирование Aт выделительные механизмы (чихание, кашель); -комплемент; -пропердин; - N- киллеры; -фагоцитоз. На внутриклеточную форму вируса все выше перечисленные не действует, действует только: -интерферон подавляет репродукцию любых вирусов, т.е. не обладает специфичностью. Интерферон вырабатывается лейкоцитами и лимфоцитами + NK –лимфоциты. Лабораторная диагностика вирусных заболеваний. - ВИРУСОСКОПИЯ – световая - в клетке имеются тельца Бабеша – Негри или другие включения, электронная– видны сами вирионы. - ВИРУСОЛОГИЧЕСКОЕ исследование – выделение и изучение самого вируса путем: - заражение лабораторных животных, - куриных эмбрионов, - культуры клеток тканей. - СЕРОЛОГИЧЕСКОЕ исследование (реакция нейтрализации). - МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ диагностики вирусных инфекций. ДНК зондирование и ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это метод направленного воспроизведенияДНК, позволяющий найти в исследуемом материале небольшие участки генетической информации любого организма и многократно размножить их до такого количества, достаточного для визуального учета. Позволяет обнаружить единичные экземпляры возбудителя в исследуемом материале. ИММУНОПРОФИЛАКТИКА ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ: 1) Активная профилактика - живые вакцины гриппозная, коревая, оспенная, полиомиелитная, паротитная, антирабическая (от бешенства), против желт. лихорадки, и коревой краснухи - убитые вирусные вакцины (омская геморрагическая лихорадка) - химические и генноинженерные  Гриппозная Гепатит В 2) пассивная профилактика (в очаге) - антирабические, противокоревые, противогриппозные иммунноглобулины; - интерферон и индукторы эндогенного интерферона. Классификация вирусов  РНК-содержащие ДНК-содержащие 10 семейств 6 семейств А. Миксовирусы А. Респираторные 1.Ортомиксовирусы (грипп) 1. Покс-вирусы (нат. Оспа) 2.Парамиксовирусы (корь, паротит) 2.Герпес-вирусы (герпес, ветр. оспа) 3.Аденовирусы Б. Арбовирусы (различные лихорадки) Б. Онкогенные 3.Тогавирусы 4.Парвовирусы 4.Аренавирусы 5.Паповавирусы 5.Буньявирусы 6.Реовирусы 7.Онкогенные ретровирусы В. В. 8.Рабдовирусы (бешенство) 6.Гепаднавирусы 9.Пикорнавирусы (полиомиелит) (гепатит В) 10.Коронавирусы Лекция № 15 Вирусы ДНК содержащие: 1. Вирус натуральной оспы. 2. Вирусы гепатитов. 3. ВИЧ. 1. Вирус натуральной оспы вызывает особо высоко контагиозное инфекционное заболевание, характеризуется общим поражением организма и обильной сыпью на коже и слизистых оболочках. Семейство Poxviridac (от англ. Pox- язва) Род Orthopoxviridac морфология  самый крупный вирус имеет кирпичеобразную форму с закругленными концами. 250-400нм Линейная двунитчатая ДНК ›30 структурных белков, включая ферменты, липиды и углеводы. Включает несколько антигенов: - нуклеопротеидный Аг - растворимый Аг - гемагглютинин Вирус натуральной оспы имеет общие антигены с вирусом осповакцины (коровьей оспы). Устойчивость к факторам окружающей среды: - довольно высокая устойчивость, на окружающих предметах при комнатной температуре сохраняют инфекционную устойчивость в течение нескольких недель и месяцев. - эфир и другие жирорастворимые вещества на вирус не действуют. 1000С – мгновенно 600С – 15 мин. - фенол, хлорамин – в течение нескольких часов. Длительно сохраняется в 50% растворе глицерина. Эпидемиология и патогенез. Оспа – особо опасная инфекция, т.к. высокая контагиозность. Источник – больной человек, заразен в течение всего периода болезни. Механизм передачи – воздушно- капельный и воздушно- пылевой , если кожа повреждена, то контактно- бытовой. 1936 г. – в СССР ликвидировали оспу. 1977 г. – в Сомали последний случай оспы. Вирус оспы проникает в организм через слизистую оболочку дыхательных путей (реже через поверхность кожи) → в лимфоузлы размножаются там → в кровь вирусемия → в лимфоидную ткань селезенка лим. узлы размножаются там → опять выходят в кровь → поражают различные системы организма и эпидермис кожи Инкубационный период- 8-18 дней; острое начало, высокая температура тела, головная и поясничная боль, сыпь. макула → папула → везикула → пустула → корки → рубцы пятно узелок пузырек гнойничек рябины Иммунитет: стойкий пожизненный. Лаб. диагностика: в спец. лабораториях особого режима. Материал: - содержимое элементов сыпи - кровь - в летальных случаях : кусочки органов (селезенки) Методы: - вирусоскопия – в эл. микроскоп. - серологические реакции – РИФ, РСК, РТГА, ИФА - вирусологический метод Специфическое лечение и профилактика. ИММУНИЗАЦИЯ - живой оспенной вакциной. Лечение – симптоматическая терапия, метисазон. 2. Вирусы гепатитов, поражают органы печени. Известно 7 таких вирусов : А,B,C,D,E,F,G . В зависимости от основных путей заражения выделяют энтеральные и парентеральные вир.гепатиты А и Е B,C,D F и G носительство вируса. вир.г.А Б-нь Боткина +нить РНК Морфология кубической формы 1 Аг суперкапсида нет распространен везде, особенно велик риск заражения в странах с жарким климатом, с низким уровнем соц. жизни. Устойчив во внешней среде, 1000 С- 5 мин. Распространен повсеместно. (2-ой после гриппа) Дети от 4 до 15 лет. Пик - в летне-осенний период. Источник - больные с клиническими проявлениями, так и без них. Механизм передачи: фекально-оральный. Передается ч/з воду, пищевые продукты. Предметы обихода, грязные руки, игрушки, горшки. Патогенез : ч/з воду и пищу попадает в кишечник – здесь по одним источникам происходит 1-ая репродукция, по др.- не доказано. Затем вирус в кровь - в печень – здесь также размножается, опять попадает в кишечник и с фекалиями выделяется в окружающую среду. Иммунитет пожизненный Диагностика : серологией. Материал : фекалии. Профилактика : убитой вакциной Havrix по эпидпоказаниям. Вирус гепатита E (схож с А). Инфицирующая доза д.б. выше. Св вены эпидемические вспышки, охватывающие десятки тысяч человек. Вирус гепатита B. Сывороточный гепатит. ДНК – содержащий вирус. 1 – кольцевая ДНК 2-ая не замкнутая; имеет ферменты для репликации ДНК. Есть суперкапсид. Вирус гепатита B не размножается в культурах тканей, в куриных эмбрионах, в организме лаб. животных. Характерны следующие пути передачи: парентеральный половой вертикальны (от матери к ребенку) Вирус гепатита B может выделяться в окружающую среду с биологическими жидкостями: слюной (поцелуй, укус), потом, слезами и грудным молоком. Гепатит B протекает более тяжело, чем A. У 10% - переходит в хронические формы. Эти люди являются носителями. Возможен цирроз и даже рак печени. Лаб. диагностика : серологические реакции. Специфичность проф-ка : генноинженерной вакциной Энджерикс B, иммунитет после вакцинации сох-ся в течении 3-5 лет. Вакцинации подлежат дети и медицинские работники. Вирус гепатита D обычно сопутствует вирусу гепатита B и способствует развитию тяжелых форм заболевания. Диагностика ПЦР. Вирус гепатита C +нит РНК Для заражения нужна большая инфицирующая доза. Течение болезни легкое, часто хроническое. Спец. профилактика не разработана. Вирусы гепатитов F и G чаще всего сопровождают вирус гепатита С. Характерны хронические формы заболевания. Вероятно, список вирусов, вызывающих поражение печени, в ближайшем будущем будет продолжен.  |